本公開涉及治療或預防甲狀腺素轉運蛋白介導的淀粉樣變性(attr)的方法。
背景技術：
1、系統(tǒng)性淀粉樣變性是一種由淀粉樣原纖維在器官諸如心臟、肝臟和胰腺中的進行性沉積引起的浸潤性疾病。對于心臟淀粉樣變性，最常見的形式包括免疫球蛋白輕鏈和甲狀腺素轉運蛋白淀粉樣變性。目前批準的藥物穩(wěn)定或阻斷淀粉樣變前體的產生，防止進一步的淀粉樣沉積。這種方法在減少細胞損傷和疾病進展的同時，不會去除現(xiàn)有的淀粉樣蛋白沉積物，并導致受影響的器官功能恢復，從而提高生活質量和存活率?；谀軌蜻x擇性結合淀粉樣蛋白沉積物并誘導其去除的單克隆抗體的治療策略可以代表系統(tǒng)性淀粉樣變性(諸如心臟淀粉樣變性)的關鍵治療方法。
2、已經嘗試開發(fā)在組織水平上促進淀粉樣蛋白沉積物的降解和再吸收的藥物。例如，已經研究了與血清淀粉樣蛋白(sap，一種由肝細胞產生的血漿糖蛋白，其代表所有組織中淀粉樣蛋白沉積物的支架蛋白之一)結合的抗體。然而，一項針對心臟淀粉樣變性患者的ii期研究(nct03044353)由于在這種類型的患者中益處/風險概況的明顯變化而過早終止。
3、甲狀腺素轉運蛋白(ttr)是一種參與體內甲狀腺素和視黃醇轉運的可溶性蛋白。ttr在血液中由肝臟分泌，并且在腦脊液中由脈絡叢分泌，并且還在特定組織如胰腺α細胞或視網(wǎng)膜上皮中表達。
4、在尚未闡明并且可能包括酸性ph、氧化應激和局部因素的特定條件下，ttr蛋白采用錯誤折疊、錯誤組裝和/或聚集的ttr構象并變得有毒，這可能導致甲狀腺素轉運蛋白介導的淀粉樣變性(attr)。
5、已經開發(fā)了靶向錯誤折疊、錯誤組裝和/或聚集的ttr的抗體(例如，人抗體)。需要適用于治療或預防受試者的attr的改進方法(例如，抗體給藥方案)，其具有可接受的益處/風險概況，并且優(yōu)選地盡可能方便地向受試者和醫(yī)師給藥/施用。
6、根據(jù)本發(fā)明，通過權利要求中表征的實施方案以及說明書中所公開的和權利要求之前的條項中記載的實施方案來提供上述問題的解決方案。
技術實現(xiàn)思路
1、本文特別提供了用于治療或預防野生型或遺傳性甲狀腺素轉運蛋白介導的淀粉樣變性(attr)，諸如attr-cm的方法和相關給藥方案，該attr-cm是導致心肌病(cm)的attr淀粉樣變性。更特別地，本發(fā)明提供了一種在治療需要所述治療的受試者的attr的方法中使用的抗甲狀腺素轉運蛋白(ttr)抗體，其中該方法包括按以下劑量施用抗體：對于體重等于或大于40kg(≥40kg)至低于60kg(<60kg)的患者為2000mg至2500mg；(b)對于體重等于或大于60kg(≥60kg)至低于100kg(<100kg)的患者為3000mg至3500mg；或者(c)對于體重等于或大于100kg(≥100kg)的患者為4000mg至5000mg。
2、如實施例1所示，根據(jù)本發(fā)明使用的抗ttr抗體(示例性地顯示為alxn2220，也稱為ni006)顯示出是安全的并且被人類患者良好耐受，并且通過抗體依賴性細胞吞噬(adcp)以劑量依賴性和時間依賴性方式從心臟組織中耗竭淀粉樣甲狀腺素轉運蛋白沉積物，當每四周施用一次時，在大于10mg/kg的劑量下具有最顯著的效果。此外，以每28天每千克體重60mg的最大劑量施用抗體，沒有任何藥物相關的嚴重不良事件；參見clinicaltrials.govid?nct04360434和garcia-pavia等人,phase?1trial?of?antibody?ni006for?depletionof?cardiac?transthyretin?amyloid.n.engl.j.med.389(2023),239-250，這些文獻中的每一者以引用方式并入本文。如實施例1中進一步所示，來自骨閃爍掃描和mri的數(shù)據(jù)指示，與4個月時的基線相比，30mg/kg和60mg/kg的劑量使心臟淀粉樣蛋白沉積減少了12.8％和25.6％的中值；在12個月時，中值減少分別為30.7％和50.7％。在相同的患者中，nt-probnp在12個月時減少了78.2％和72.2％。由于nt-probnp濃度通常在未治療的attr-cm患者中逐漸增加并且與患者死亡率強烈相關，因此該數(shù)據(jù)表明本公開的抗ttr抗體在治療和/或預防人類患者的attr-cm中的有用性。
3、雖然可以證明用抗ttr抗體進行attr免疫療法是可能的，但是臨床試驗中使用的通過體重調整劑量的給藥方案在臨床實踐中證明是不合適的，因為體重調整劑量的施用是復雜的并且容易出錯，例如在測量體重、計算待施用的適當劑量以及從小瓶中抽取對應的藥物體積時。此外，這種方法產生大量的藥物浪費，其對應于小瓶中剩余的未施用于患者的藥物的量。
4、因此，基于1期臨床試驗、14天重復劑量glp毒性研究和pk建模的結果，已經開發(fā)了新的劑量方案，即體重分級固定劑量，以克服上述缺點。
5、在這種情況下，建立了pk/pd模型，并且已經計算出在2000mg至5000mg范圍內的安全且有效的固定劑量；參見實施例5。在這種情況下，大鼠中的單次和重復劑量pk研究證實了igg1分子的藥代動力學(pk)曲線?？紤]到所有這些，已經計算出體重調整的固定劑量，其中已經計算出對于體重等于或大于40kg(≥40kg)至低于60kg(<60kg)的患者在2000mg至2500mg范圍內的劑量，對于體重等于或大于60kg(≥60kg)至低于100kg(<100kg)的患者在3000mg至3500mg范圍內的劑量，以及對于體重等于或大于100kg(≥100kg)的患者在4000mg至5000mg范圍內的劑量，這些劑量是安全且有效的。因此，本發(fā)明涉及一種在治療需要所述治療的受試者的甲狀腺素轉運蛋白介導的淀粉樣變性(attr)的方法中使用的抗甲狀腺素轉運蛋白(ttr)抗體，其中該方法包括施用以下劑量的抗體：對于體重等于或大于40kg(≥40kg)至低于60kg(<60kg)的患者為2000mg至2500mg；(b)對于體重等于或大于60kg(≥60kg)至低于100kg(<100kg)的患者為3000mg至3500mg；或者(c)對于體重等于或大于100kg(≥100kg)的患者為4000mg至5000mg。
6、更具體地，在一個初始實施方案中，提出以下劑量：如果體重≥100kg，則為5000mg；如果60kg≤體重<100kg，則為3500mg；如果體重<60kg，則為2500mg，每28天(q4w)經由iv施用。那些體重分級固定劑量被進一步優(yōu)化以確保施用每個小瓶中存在的全部量的藥物并消除殘留體積和對應的藥物浪費，同時保持相同的預測功效，并且計算得到結果：對于體重等于或大于40kg(≥40kg)至低于60kg(<60kg)的患者為2400mg；對于體重等于或大于60kg(≥60kg)至低于100kg(<100kg)的患者為3200mg；或者對于體重等于或大于100kg(≥100kg)的患者為4800mg；參見實施例6。因此，在一個優(yōu)選的實施方案中，抗體以2400mg的劑量施用于體重等于或大于40kg(≥40kg)至低于60kg(<60kg)的患者，以3200mg的劑量施用于體重等于或大于60kg(≥60kg)至低于100kg(<100kg)的患者，或以4800mg的劑量施用于體重等于或大于100kg(≥100kg)的患者。這些固定劑量用于如實施例8中概述的3期臨床試驗方案(ctp)中。如ctp中所例示，在施用研究藥物期間和輸注后觀察期期間監(jiān)測的一個概念包括在篩選時以及在第1周、第3周、第12周和此后大約每12周輸注前和輸注后監(jiān)測心率、血壓和血氧飽和度以及ecg評估。
7、如上所述，在實施例1中提及的臨床試驗中，抗體alxn2220/ni006已用作藥物物質。ni006的親本抗體已首先描述于wo?2015/092077a1(命名為抗體ni-301.37f1)和michalon等人，nat.commun.12(2021),3142(命名為抗體ni301a)中。如wo?2015/092077a1中所公開的，ni006(ni-301.37f1)的特征尤其在于結合至聚集的人野生型甲狀腺素轉運蛋白(wtattr)，其在圖2至圖4和圖7中示出并且在實施例3至實施例6中描述，并且在第46頁最后一段進一步描述。此外，wo?2015/092077a1公開了ni006(ni-301.37f1)不結合至人天然甲狀腺素轉運蛋白(ttr)的單體和二聚體，如實施例5和圖4所示。這種結合譜是有利的，因為抗體選擇性地結合至聚集的wtttr，因此允許表面上不僅考慮治療遺傳性甲狀腺素轉運蛋白淀粉樣變性(hattr)伴多發(fā)性神經病(以前稱為家族性淀粉樣多發(fā)性神經病，fap)，這是由于編碼ttr的基因中的突變引起的，而且還考慮治療野生型甲狀腺素轉運蛋白淀粉樣變性(wtattr)，稱為老年性系統(tǒng)性淀粉樣變性(ssa)。此外，抗體不存在干擾天然單體組裝成生理性四聚體的風險。所述抗體已通過在其可變區(qū)或結合結構域中包含互補決定區(qū)(cdr)和可變重鏈(vh)和可變輕鏈(vl)來描述，這些鏈分別具有wo?2015/092077a1的圖1c和圖1m中所描繪的氨基酸序列。美國專利10,344,080中的公開內容以引用方式并入與其相關的部分(例如，vhcdr1-3和vlcdr1-3的序列，包括vh和vl鏈的序列)中。
8、原則上，根據(jù)本發(fā)明可以使用任何抗ttr抗體，該抗體識別ttr的淀粉樣變形式，即聚集的ttr種類，并且優(yōu)選為人聚集的ttr，但不結合至生理性ttr種類。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明使用的抗ttr抗體是ni006/alxn2220或基本上具有ni006的ttr結合譜并且優(yōu)選是人源的等效抗體。例如，wo?2015/092077a1公開了顯示所述結合譜的兩種另外的人抗體(即，抗體ni-301.59f1和ni-301.35g11)，以及具有與ni006(ni-301.37f7)基本上相同的表位的兩種人抗體ni-301.28b3和ni301.12d3。更優(yōu)選地，等效抗體衍生自人抗體ni-301.37f1，如wo2015/092077a1和michalon等人，nat?commun.12(2021),3142中所表征；也參見上文。
9、因此，在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明使用的抗體或抗原結合片段包含含有互補決定區(qū)(cdr)的重鏈可變區(qū)，這些互補決定區(qū)包含重鏈cdr1-3和輕鏈cdr1-3，該重鏈cdr1-3的序列分別示于seq?id?no:1-3中，該輕鏈cdr1-3的序列示于seq?id?no:4-6中，其中抗ttr抗體或其抗原結合片段包含與seq?id?no:7具有至少80％序列同一性的重鏈可變區(qū)和包含與seq?id?no:8具有至少80％序列同一性的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)。
10、在一些實施方案中，vh區(qū)包含與seq?id?no:7具有至少80％序列同一性(例如，至少85％、90％、95％、97％、99％或100％序列同一性)的氨基酸序列，并且vl包含與seq?idno:8具有至少80％序列同一性(例如，至少85％、90％、95％、97％、99％或100％序列同一性)的氨基酸序列。
11、在一些實施方案中，vh區(qū)包含與seq?id?no:11具有至少80％序列同一性(例如，至少85％、90％、95％、97％、99％或100％序列同一性)的氨基酸序列，并且vl包含與seq?idno:12具有至少80％序列同一性(例如，至少85％、90％、95％、97％、99％或100％序列同一性)的氨基酸序列。
12、優(yōu)選地，vh區(qū)包含seq?id?no:7的氨基酸序列，并且vl包含seq?id?no:8的氨基酸，或者vh區(qū)包含seq?id?no:11的氨基酸序列，并且vl包含seq?id?no:8或12的氨基酸，優(yōu)選地seq?id?no:8。
13、為了避免施用本文所述的抗體的受試者產生“抗藥物抗體”(ada)，抗體優(yōu)選為人或人源化抗體，通常是人igg，并且最優(yōu)選為人igg1。在一個優(yōu)選的實施方案中，抗體是人igg1m3同種異型。
14、根據(jù)本發(fā)明使用的抗體ni006/alxn2220是完全人igg1m3同種異型抗體，因此包含如seq?id?no:9中所例示的人恒定重鏈(hc)氨基酸序列和如seq?id?no:10中所例示的對應的人恒定輕鏈(lc)，此處為κ輕鏈。如下面進一步解釋的，igg抗體被制成由hc和兩條通過二硫鍵連接的輕lc鏈組成的四聚體?？贵wni006/alxn2220的理論分子量為144.2kda，并且通過質譜法(ms)測定的重量分別為144.2kda(去糖基化)以及147.0kda至147.6kda(完整igg1)。
15、抗體ni006/alxn2220已在中國倉鼠卵巢(cho)-k1細胞中產生。cho細胞是最廣泛用于產生重組單克隆抗體的哺乳動物細胞，這是由于它們能夠對抗體分子進行翻譯后修飾(ptm)，這通常也發(fā)生在人體中。通過誘變的基因操作，已經建立了具有改善的質量的不同cho子細胞。在這些變體中有cho-k1、cho-s、cho-dxb11和cho-dg44。因此，在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明使用的抗體在cho細胞中產生，優(yōu)選地在cho-k1細胞系中產生，并從細胞培養(yǎng)基中純化以供進一步使用。
16、如實施例7中所示，在抗體ni006/alxn2220中已經鑒定的主要ptm是在hc中將n-末端處的谷氨酰胺修飾為焦谷氨酸、c-末端賴氨酸的缺失和n-糖基化。在這種情況下，在位置300處鑒定了n-糖基化位點(hc?n300，seq?id?no:9)。因此，在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明使用的抗體缺失c-末端賴氨酸，即，抗體經歷c-末端賴氨酸剪切。特別地，如seq?id?no:9中所示的c-末端賴氨酸從抗體的重鏈，優(yōu)選地從抗體的每條重鏈切除。另選地，n-末端處的谷氨酰胺被修飾為焦谷氨酸，即，如seq?id?no:9中所示的抗體的重鏈經歷n-末端谷氨酰胺酰基環(huán)化。所述序列，即包含環(huán)狀焦谷氨酸并且不含n-末端谷氨酸的重鏈的序列在seq?idno:14中示出。
17、另選地，根據(jù)本發(fā)明使用的抗體的重鏈缺失c-末端賴氨酸，并且n-末端處的谷氨酰胺被修飾為焦谷氨酸。所述序列，即具有剪切的c-末端賴氨酸并且包含環(huán)狀焦谷氨酸且不包含n-末端谷氨酸的重鏈的序列在seq?id?no:15中示出。
18、此外或另選地，抗體是糖基化的，特別是n-糖基化的。更特別地，抗體的重鏈是糖基化的，并且甚至更特別地是重鏈的n300。
19、在一個優(yōu)選的實施方案中，根據(jù)本發(fā)明使用的抗ttr抗體缺少c-末端半胱氨酸，在n-末端處具有修飾的谷氨酰胺作為焦谷氨酸，并且包含至少一個n-糖基化位點。
20、因此，在一個優(yōu)選的實施方案中，根據(jù)本發(fā)明使用的抗體由兩條具有seq?id?no:9的重鏈和兩條具有seq?id?no:10的輕鏈組成，并且其中在重鏈中，n-末端處的谷氨酰胺被修飾為焦谷氨酸，c-末端賴氨酸缺失，并且重鏈是n-糖基化的。換句話講，根據(jù)本發(fā)明使用的抗體優(yōu)選地由兩條具有seq?id?no:15的重鏈和兩條具有seq?id?no:10的輕鏈組成，并且其中重鏈是n-糖基化的。
21、如上所述，根據(jù)本發(fā)明使用的抗ttr抗體以劑量依賴性和時間依賴性方式從心臟組織中耗竭淀粉樣甲狀腺素轉運蛋白。因此，在一些實施方案中，attr淀粉樣變性導致心肌病(cm)，因此，在一個優(yōu)選的實施方案中，根據(jù)本發(fā)明治療的受試者患有attr淀粉樣變性伴cm(attr-cm)。在一個優(yōu)選的實施方案中，待治療的受試者患有變異型attr(attrv/hattr)或野生型attr-cm(wattr)。甚至更優(yōu)選地，待治療的受試者患有變異型attr-cm(attrv-cm/hattr-cm)或野生型attr-cm(wattr-cm)。
22、在一些實施方案中，受試者患有attr多發(fā)性神經病(attr-pn)。在一些實施方案中，受試者患有家族性淀粉樣多發(fā)性神經病(fap)。在一些實施方案中，受試者患有家族性淀粉樣心肌病(fac)。在一些實施方案中，受試者患有老年性系統(tǒng)性淀粉樣變性(ssa)。在一些實施方案中，受試者患有系統(tǒng)性家族性淀粉樣變性。在一些實施方案中，受試者患有軟腦膜/中樞神經系統(tǒng)(cns)淀粉樣變性。在一些實施方案中，受試者患有阿爾茨海默病(alzheimer?disease)。在一些實施方案中，受試者患有ttr相關的眼部淀粉樣變性。在一些實施方案中，受試者患有ttr相關的腎淀粉樣變性。在一些實施方案中，受試者患有ttr相關的高甲狀腺素血癥。在一些實施方案中，受試者患有ttr相關的韌帶淀粉樣變性，包括腕管綜合征。在一些實施方案中，受試者患有肩袖撕裂和腰椎管狹窄。在一些實施方案中，受試者患有先兆子癇。
23、在一些實施方案中，受試者因已知致病性ttr突變而被診斷患有遺傳性attr-cm。
24、在一些實施方案中，受試者患有偶發(fā)性、野生型attr-cm(wt-attr-cm)(例如，編碼在心臟中形成沉積物的ttr蛋白的野生型attr基因)并且針對ttr突變的基因測試為陰性。
25、優(yōu)選地，診斷基于癥狀性attr，優(yōu)選attr-cm的存在或者基于>2000pg/ml的nt-probnp水平。nt-probnp用作attr中的生物標志物在本領域中是公認的并且基于所述生物標志物的水平(與心肌肌鈣蛋白t(ctnt)的水平組合(grogan等人，j?am?coll?cardiol?68(2016),1014–1020)或與估計腎小球濾過率(egfr)組合(gillmore等人，european?heartjournal?39(2018),2799-2806))，已經開發(fā)了nt-probnp的截止值為3000pg/ml的分期系統(tǒng)；也參見perfetto等人，internal?and?emergency?medicine?17(2022),957–969。因此，取決于ctnt的水平和egfr，并且僅考慮nt-probnp的水平，受試者患有i級、ii級和iii級心臟attr。因此，待治療的受試者優(yōu)選地具有attr(優(yōu)選attr-cm)的癥狀并且/或者具有>2000pg/ml的nt-probnp水平。
26、此外或另選地，受試者是成年受試者，特別是成人受試者，優(yōu)選為18歲或更大但小于90歲(≥18歲至≤90歲)的受試者。
27、因此，本發(fā)明的治療方案可用于治療具有任何一種或所有提及的適應癥/特征的受試者。
28、在一個實施方案中，用根據(jù)本發(fā)明使用的抗體治療人類受試者導致較低的心臟淀粉樣蛋白負荷和/或全因死亡(acm)和總心血管(cv)臨床事件和/或心力衰竭(hf)事件的復合終點。在一些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明方法用抗ttr抗體進行的治療導致患者中的心臟淀粉樣蛋白負荷在指定的治療持續(xù)時間(例如4個月、6個月、8個月、10個月、12個月、15個月、18個月、21個月或24個月或更長時間，例如48個月)之后劑量依賴性和時間依賴性減少至少約25％、約30％、約35％、約40％、約45％、約50％、約55％、約60％或更高，例如約70％、約80％、約90％。
29、優(yōu)選地，本發(fā)明的治療，即給藥方案的施用改善以下中的至少一者：
30、(a)癥狀、功能和健康相關的生活質量(qol)，如通過堪薩斯城心肌病問卷總體總結(kccq-os)評分相對于基線變化所測量的；
31、(b)心血管(cv)相關死亡的時間；
32、(c)與基線相比的六分鐘步行測試(6mwt)評分；
33、(d)心血管(cv)臨床事件的比率；和
34、(e)全因死亡(acm)的時間。
35、在一個實施方案中，治療
36、(a)與基線相比，降低受試者的nt-probnp水平；
37、(b)降低心力衰竭(hf)事件的比率；
38、(c)降低強化口服利尿劑療法的發(fā)生率，所述療法任選地包括門診強化口服利尿劑療法；
39、(d)降低疾病修飾療法變化的發(fā)生率；
40、(e)降低因心房顫動而住院的發(fā)生率；
41、(f)在研究治療24個月后，引起堪薩斯城心肌病問卷總體總結(kccq-os)評分相對于基線的變化；
42、(g)在研究治療24個月后，引起六分鐘步行測試(6mwt)相對于基線的變化；
43、(h)引起基于mayo、nac和columbia疾病分期和nyha分類的attr-cm疾病嚴重程度相對于基線的變化；
44、(i)引起gls相對于基線的變化；
45、(j)引起每搏輸出量相對于基線的變化；
46、(k)引起感興趣的超聲心動圖參數(shù)相對于基線的變化；
47、(l)引起hs-ctnt相對于基線的變化；
48、(m)引起dpd/pyp/hmdp心臟閃爍掃描心臟攝取和/或cmri-衍生的ecv、t1和t2圖譜相對于基線的變化；
49、(n)引起egfr相對于基線的變化
50、(o)引起eq-5d-5l評分相對于基線的變化并且/或者引起sf-36評分相對于基線的變化；
51、(p)引起選自crp、il?il1b、il6、il8、ifng、tnf-α、il10、il1ra、c3和c4、血清淀粉樣蛋白a和鐵蛋白的標志物相對于基線的變化；優(yōu)選地，作為crp的標志物相對于基線的變化；
52、(q)引起選自血清羧基末端picp、piiinp、血清citp和血漿pro-c6的標志物相對于基線的變化；
53、(r)引起選自ttr(前白蛋白)、tsh、rbp和ft4的標志物相對于基線的變化；
54、(s)引起以下相對于基線的變化：(1)pnd評分和fap分期；(2)norfolk?qol-dn總評分；和/或snfl水平；并且/或者
55、(t)引起nis相對于基線的變化并且/或者引起nc研究的變化。
56、在一些實施方案中，每四周一次(q4w)向受試者施用根據(jù)本發(fā)明使用的抗體。
57、在一些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明使用的抗體經靜脈內(iv)，優(yōu)選地經由iv輸注施用于受試者，即如上文所定義的治療方法包括經靜脈內(iv)，優(yōu)選地經由iv輸注將抗體施用于受試者。
58、在一些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明使用的抗體被施用至少24個月，優(yōu)選地至少48個月，即，治療方法包括施用抗體至少24個月，優(yōu)選地至少48個月。
59、在一些實施方案中，基于患者的記錄體重，以體重分級固定劑量，優(yōu)選以如上文定義的固定劑量施用根據(jù)本發(fā)明使用的抗體，其中體重的記錄在計劃施用的30天內進行，其中所述劑量每四周(q4w)經由輸注靜脈內(iv)施用，即該方法包括基于患者的記錄體重，以體重分級固定劑量，優(yōu)選地以如上文定義的固定劑量施用抗體，其中體重的記錄在計劃施用的30天內進行，其中所述劑量每四周(q4w)經由輸注靜脈內(iv)施用。
60、在藥物學研究(michalon,2021)中，顯示ni006/alxn2220經由結合至fcγ受體來激活免疫細胞。使用不同的體外和體內模型已經證明，ni006/alxn2220通過免疫驅動的吞噬清除以劑量依賴性和時間依賴性方式觸發(fā)從患者樣品中消除attr原纖維。因此，ni006/alxn2220通過吞噬性免疫細胞(諸如巨噬細胞)誘導抗體介導的對attr原纖維的吞噬作用，從而導致從組織中清除attr沉積物。
61、因此，在一些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明使用的抗體通過免疫驅動的吞噬清除以劑量依賴性和時間依賴性方式觸發(fā)從患者樣品中消除attr原纖維。
62、在1期研究ni006-101中，每月一次的ni006/alxn2220治療在患有attr-cm的成年患者中通常是安全且耐受良好的，直至測試的最高劑量(即，60mg/kg?iv?q4w)。ni006/alxn2220pk曲線被視為與劑量成比例，提供持續(xù)的抗體水平并且與每月給藥相容。在本研究中，使用2種不同的方法估計心臟中attr沉積物的量：通過閃爍掃描對心臟中的心臟示蹤劑攝取進行定量或通過cmri定量ecv。這2個pd測量值代表心臟淀粉樣蛋白負荷，并且用于估計基線淀粉樣蛋白負荷和臨床研究期間隨時間的變化。ni006/alxn2220顯示，在12個月時，在60mg/kg處，心臟淀粉樣蛋白負荷的劑量依賴性和時間依賴性減少高達約51％。因此，優(yōu)選地，經由心臟示蹤劑攝取閃爍掃描或用cmri定量ecv來測量抗ttr抗體治療對attr原纖維的消除；參見1期研究ni006-101。更優(yōu)選地，用抗ttr抗體治療患者導致心臟淀粉樣蛋白負荷的劑量依賴性和時間依賴性減少在12個月時高達約51％，優(yōu)選地其中向患者施用的劑量對應于約60mg/kg。因此，在一些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明方法用抗ttr抗體進行的治療導致患者中的心臟淀粉樣蛋白負荷在指定的治療持續(xù)時間(例如4個月、6個月、8個月、10個月、12個月、15個月、18個月、21個月或24個月或更長時間，例如48個月)之后劑量依賴性和時間依賴性減少至少約25％、約30％、約35％、約40％、約45％、約50％、約55％、約60％或更多，例如約70％、約80％、約90％。
63、在一些實施方案中，待用根據(jù)本發(fā)明的抗體治療的患者是男性或女性受試者，他們
64、(1)基于通過超聲心動圖或cmri的心臟淀粉樣變性證據(jù)和以下中的一者，被中心確診為具有野生型或變異型ttr基因型的attr-cm：
65、a.心內膜心肌活檢，通過免疫組織化學或質譜法進行確證性ttr淀粉樣蛋白分型；或
66、b.在不存在單克隆丙種球蛋白病的情況下，99mtc閃爍掃描(99mtc?dpd、99mtcpyp或99mtc?hmdp)顯示2級或3級心臟攝??；或
67、c.在存在單克隆丙種球蛋白病的情況下，99mtc閃爍掃描(99mtc?dpd、99mtc?pyp或99mtc?hmdp)顯示2級或3級心臟攝取并且在非心臟組織中通過免疫組織化學或質譜法進行確證性ttr淀粉樣蛋白分型；
68、(2)如果先前未進行基因測試或者如果基因結果不可用，則愿意在篩選期間對ttr基因中的突變進行基因測試
69、(3)在篩選時測得的超聲心動圖顯示女性的舒張末期室間隔壁厚≥11mm或男性的舒張末期室間隔壁厚≥12mm
70、(4)在篩選時中心實驗室測量的nt-probnp>2000pg/ml
71、(5)在篩選前用袢利尿劑治療至少30天；
72、(6)具有在篩選前1年內由以下事件中的一個事件記錄的心力衰竭病史：
73、a.心力衰竭住院
74、b.緊急心力衰竭就診
75、c.由nt-probnp>2000pg/ml(或等效bnp)記錄的容量過度負荷發(fā)作
76、(7)在篩選時為紐約心臟協(xié)會(nyha)分級ii-iv級；并且/或者
77、(8)根據(jù)臨床醫(yī)生的判斷，具有至少6個月的預期壽命。
78、如歐洲專利申請ep?22?207?645.7和美國臨時申請63/383,803和63/503,286中所概述，以及在2023年11月15日提交的標題為“pharmaceutical?compositions?fortreating?or?preventing?transthyretin-mediated?amyloidosis”的國際申請(代理人案件號：ne30a100/p-wo)(其內容以引用方式并入本文)中所詳細概述的，已經發(fā)現(xiàn)在ph?5.8的20mm組氨酸緩沖液、80mg/ml或65mg/ml蔗糖和0.3mg/ml聚山梨醇酯80中包含50mg/ml抗體(即，alxn2220/ni006)的制劑特別適合于確保藥物產品的長期穩(wěn)定性。因此，在如以下實施例中所述的臨床試驗中已經使用在ph?5.8的20mm組氨酸緩沖液、80mg/ml蔗糖和0.3mg/ml聚山梨醇酯80中包含50mg/ml的抗體(即alxn2220/ni006)的制劑。
79、因此，在一些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明使用的抗體以在ph?5.8的20mm組氨酸緩沖液(例如，l-組氨酸和l-組氨酸單鹽酸鹽)、80mg/ml蔗糖、0.3mg/ml聚山梨醇酯80中的50mg/ml的藥物制劑形式施用。另選地，根據(jù)本發(fā)明使用的抗體以在ph?5.8的20mm組氨酸緩沖液(例如，l-組氨酸和l-組氨酸單鹽酸鹽)、65mg/ml蔗糖、0.3mg/ml聚山梨醇酯80中的50mg/ml的藥物制劑形式施用。
80、優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明使用的抗體以靜脈內(iv)輸注形式施用于患者，在2小時內進行初始施用并且在1小時內進行后續(xù)施用，即，該方法包括將抗體以靜脈內(iv)輸注形式施用于患者，在2小時內進行初始施用并且在1小時內進行后續(xù)施用。
81、在一些實施方案中，受試者先前已經用選自ttr沉默劑和ttr穩(wěn)定劑的疾病修飾劑治療并且/或者同時接受該疾病修飾劑。例如，ttr四聚體穩(wěn)定劑可以是二氟尼柳、氯苯唑酸(或)或阿克羅胺(acoramidis)(ag10)。目前，起口腔疾病緩解治療作用的氯苯唑酸是唯一批準的特異性靶向野生型和遺傳性形式的attr-cm的藥物治療。根據(jù)本發(fā)明，顯示在氯苯唑酸的存在下保持alxn2220活性。
82、在一些實施方案中，根據(jù)表25中提供的干預輸注時間表施用根據(jù)本發(fā)明使用的抗體長達24個月。優(yōu)選地，在24個月治療期之后，根據(jù)表26的干預輸注時間表施用根據(jù)本發(fā)明使用的抗體作為后續(xù)治療。因此，在一個實施方案中，該方法包括根據(jù)表25中提供的干預輸注時間表施用抗體長達24個月，并且優(yōu)選地，在24個月治療期之后，根據(jù)表26的干預輸注時間表施用抗體作為后續(xù)治療。
83、如實施例中所示，當在患者中以30mg/kg和60mg/kg的劑量施用抗體時，用抗ttr抗體進行的治療導致中值淀粉樣蛋白減少，并且基于pk建模，預期在固定劑量的情況下會發(fā)生相同的淀粉樣蛋白減少。因此，在一些實施方案中，當根據(jù)本發(fā)明使用抗ttr抗體時，當以對應于患者中30mg/kg至60mg/kg劑量的劑量施用抗體時，用該抗體進行的治療導致中值淀粉樣蛋白減少。優(yōu)選地，用包括表皮內神經纖維密度(ienfd)和/或汗腺神經纖維密度(sgnfd)的心內膜心肌活檢來測量治療功效。
84、在一些實施方案中，基于以下對患者進行分層：
85、(1)用疾病修飾劑進行的預先治療，其中所述疾病修飾劑選自(a)ttr沉默劑，任選地連同ttr穩(wěn)定劑；(b)單獨的ttr穩(wěn)定劑；以及(c)
86、無ttr穩(wěn)定劑或ttr沉默劑治療；
87、(2)ttr基因型，包括attr變異型(attrv)或attr野生型(attrwt)的；或
88、(3)基于心臟生物標志物水平的疾病嚴重程度，包括nt-
89、probnp>3000pg/ml與nt-probnp≤3000pg/ml，任選地連同治療前和治療后的高敏心肌肌鈣蛋白c(hs-ctnt)水平。
90、此外，為了監(jiān)測治療效率，可在用根據(jù)本發(fā)明使用的抗體治療前和治療后監(jiān)測血清生物標志物水平。特別地，在一些實施方案中，生物標志物選自：(a)選自c3和c4的補體因子，以及crp；(b)選自il1b、il6、il8、ifng和tnf-α的促炎細胞因子；(c)選自il10、il1ra的抗炎細胞因子；(d)選自saa和鐵蛋白的正性急性期蛋白；(e)picp；(f)piiinp；(g)citp；(h)pro-c6；以及(i)血漿nnttr，或它們的組合。
91、定義
92、為了避免任何疑問，要強調的是，使用表述“在一些實施方案中”、“在某些實施方案中”、“在某些情況下”、“在一些情況下”、“在一些方面中”、“在另外的實施方案中”、“在一個實施方案中”、“在另外的方面”、“在第一方面”、“在第二方面”等，并且意指其中描述的任何實施方案都應考慮組合那些實施方案的特征中的每個特征來閱讀，并且必須以與那些實施方案和方面的特征的組合將在一個實施方案中被闡明的相同方式來對待本公開。對于所附權利要求和實施例中例示的實施方案和特征的任何組合也是如此，它們也旨在與說明書中公開的相應實施方案的特征組合，其中僅為了一致性和簡潔，實施方案的特征在于依賴性，而實際上，可能由于(多個)依賴性而被解釋的每個實施方案和特征的組合必須被視為字面上公開的，而不被認為是不同選擇之間的選擇。在這種情況下，本領域的技術人員將理解，實施例中公開的實施方案和特征旨在推廣到任何抗ttr抗體和具有基本上相同特性的等同物。
93、如本文所用，術語“約”是指所述值的±10％的值；優(yōu)選地±5％。
94、結合本發(fā)明，術語“和/或”應理解為意指由術語“和/或”連接的組的所有成員以任何組合累積地公開，彼此交替地公開并且在每種情況下彼此公開。對于表述“a、b和/或c”，這意味著以下公開內容應在其下理解：a)a或b或c；或b)(a和b)；或c)(a和c)；或d)(b和c)；或e)(a和b和c)。
95、如本文所用，術語“抗體”包括其相應的結合片段，并且本文提及的劑量是指對于完整igg1抗體，分子量為約147kda的ni006。因此，對于使用mw顯著不同的抗體，可相應地調整劑量。類似地，如果使用具有較低或較長血清半衰期的抗體，例如由于改變的糖基化和/或修飾諸如聚乙二醇化，則可分別重新計算劑量和給藥間隔。
96、如本文所用，術語“藥物組合物”是指含有治療劑(例如，本文所述的抗ttr抗體)的混合物，任選地與一種或多種藥學上可接受的賦形劑、稀釋劑和/或載體組合。例如，藥物組合物被配制用于施用于受試者，諸如哺乳動物，例如人，以預防、治療或控制影響或可能影響受試者的特定疾病或病狀(例如，attr，諸如attr-cm、attr多發(fā)性神經病(attr-pn)、家族性淀粉樣多發(fā)性神經病(fap)、家族性淀粉樣心肌病(fac)、老年性系統(tǒng)性淀粉樣變性(ssa)、系統(tǒng)性家族性淀粉樣變性、軟腦膜/中樞神經系統(tǒng)(cns)淀粉樣變性(包括阿爾茨海默病)、ttr相關的眼部淀粉樣變性、ttr相關的腎淀粉樣變性、ttr相關的高甲狀腺素血癥、ttr相關的韌帶淀粉樣變性(包括腕管綜合征、肩袖撕裂和腰椎管狹窄)以及先兆子癇)。
97、如本文所用，術語“藥學上可接受的”是指在合理的醫(yī)學判斷范圍內適合用于與受試者(諸如，哺乳動物(例如人))的組織接觸而沒有過度毒性、刺激、過敏反應或其他問題或并發(fā)癥，與合理的益處/風險比相稱的那些化合物、材料、組合物和/或劑型。
98、如本文所用，表述“能夠結合”和“結合至”是指抗體在實驗條件下，例如在elisa測定中結合至例如聚集的ttr的能力。
99、如本文所用，術語“之間”包括端值。
100、相對于參考多核苷酸或多肽序列的“序列同一性百分比(％)”定義為在比對序列并在必要時引入缺口以實現(xiàn)最大序列同一性百分比之后，候選序列中與參考多核苷酸或多肽序列中的核酸或氨基酸相同的核酸或氨基酸的百分比。用于確定核酸或氨基酸序列同一性百分比的比對可以在本領域技術人員的能力范圍內的各種方式實現(xiàn)，例如使用公眾可獲得的計算機軟件，諸如blast、blast-2或megalign軟件。本領域技術人員可以確定用于比對序列的適當參數(shù)，包括在所比較的序列的全長上實現(xiàn)最大比對所需的任何算法。例如，可以使用序列比較計算機程序blast生成序列同一性百分比值。作為例示，給定的核酸或氨基酸序列a相對于給定的核酸或氨基酸序列b，a與b或a對b的序列同一性百分比(其可以另選地表述為給定的核酸或氨基酸序列a相對于給定的核酸或氨基酸序列b，a與b或a對b具有特定的序列同一性百分比)如下計算：
101、100乘以(分數(shù)x/y)
102、其中x是通過序列比對程序(例如，blast)在該程序的a和b的比對中作為相同匹配評分的核苷酸或氨基酸的數(shù)目，并且其中y是b中核酸的總數(shù)。應當理解，當核酸或氨基酸序列a的長度不等于核酸或氨基酸序列b的長度時，a與b的序列同一性百分比將不等于b與a的序列同一性百分比。
103、如本文所用，術語“治療”是指治療性治療和預防性或防止性措施，其中目標是為了防止或減緩(減輕)不期望的生理學變化或病癥，諸如心臟缺陷的進展。有益的或期望的臨床結果包括但不限于減輕癥狀、減小疾病程度、使疾病狀態(tài)穩(wěn)定(即，不惡化)、延遲或減緩疾病進展、改善或緩和疾病狀態(tài)以及可檢測或不可檢測的緩解(無論是部分還是全部)?！爸委煛边€可以意指與如果不接受治療的預期存活相比延長存活(例如，將患有attr的人類受試者的存活延長至少1年、2年、3年、4年、5年、6年、7年、8年、9年、10年、11年、12年、13年、14年、15年、16年、17年、18年、19年、20年或更多年，例如，受試者的一生)。需要治療的那些包括已經患有病狀或病癥的那些，以及易患病狀或病癥的那些或要預防病狀或病癥的表現(xiàn)的那些。
104、如本文所用，術語“負荷劑量”是指約600mg至4000mg(例如，2400mg、2500mg、3000mg、3200mg或3500mg)的抗體的劑量，該劑量將受試者的血液(例如，血清或血漿)濃度增加至接受治療的受試者的期望治療水平(例如，≥1μg/ml，例如，≥1μg/ml、≥2.5μg/ml、≥5μg/ml、≥10μg/ml、≥20μg/ml、≥30μg/ml、≥40μg/ml、≥50μg/ml、≥60μg/ml、≥70μg/ml、≥80μg/ml、≥90μg/ml、≥100μg/ml、≥110μg/ml、≥120μg/ml、≥130μg/ml、≥140μg/ml、≥150μg/ml、≥160μg/ml、≥170μg/ml、≥180μg/ml、≥190μg/ml、≥200μg/ml、≥210μg/ml、≥220μg/ml、≥230μg/ml、≥240μg/ml、≥250μg/ml、≥260μg/ml、≥270μg/ml、≥280μg/ml、≥290μg/ml、≥300μg/ml、≥310μg/ml、≥320μg/ml、≥330μg/ml、≥340μg/ml、≥350μg/ml、≥360μg/ml、≥370μg/ml、≥380μg/ml、≥390μg/ml、≥400μg/ml、≥410μg/ml、≥420μg/ml、≥430μg/ml、≥440μg/ml、≥450μg/ml、≥460μg/ml、≥470μg/ml、≥480μg/ml、≥490μg/ml、≥500μg/ml、≥510μg/ml、≥520μg/ml、≥530μg/ml、≥540μg/ml、≥550μg/ml、≥560μg/ml、≥570μg/ml、≥580μg/ml、≥590μg/ml、≥600μg/ml、≥610μg/ml、≥620μg/ml、≥630μg/ml、≥640μg/ml、≥650μg/ml、≥660μg/ml、≥670μg/ml、≥680μg/ml、≥690μg/ml、≥700μg/ml、≥710μg/ml、≥720μg/ml、≥730μg/ml、≥740μg/ml、≥750μg/ml、≥760μg/ml、≥770μg/ml、≥780μg/ml、≥790μg/ml、≥800μg/ml、≥810μg/ml、≥820μg/ml、≥830μg/ml、≥840μg/ml、≥850μg/ml、≥860μg/ml、≥870μg/ml、≥880μg/ml、≥890μg/ml、≥900μg/ml、≥910μg/ml、≥920μg/ml、≥930μg/ml、≥940μg/ml、≥950μg/ml、≥960μg/ml、≥970μg/ml、≥980μg/ml、≥990μg/ml、≥1000μg/ml或更多)。舉例來說，在向受試者施用維持劑量(例如，第一維持劑量或任何后續(xù)維持劑量)之前，可以每周一次(例如，每7天)、每隔一周一次(例如，兩周一次或每14天)、每月一次(例如，每28天±7天)或每隔一月一次(例如，兩月一次，例如，每56天±7天)向受試者施用一個或多個(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多個)負荷劑量。
105、如本文所用，術語“維持劑量”是指約600mg至6000mg(例如，分別為2500mg、3000mg、3500mg或5000mg，以及2400mg、3200mg或4800mg)或10mg/kg-60mg/kg(例如10mg/kg、30mg/kg或60mg/kg)的抗體的劑量，該劑量維持抗體的期望最小血液(例如血清或血漿)濃度。例如，期望在接受治療的受試者的血液(例如，血清或血漿)中維持≥1μg/ml(例如，≥1μg/ml、≥2.5μg/ml、≥5μg/ml、≥10μg/ml、≥20μg/ml、≥30μg/ml、≥40μg/ml、≥50μg/ml、≥60μg/ml、≥70μg/ml、≥80μg/ml、≥90μg/ml、≥100μg/ml、≥110μg/ml、≥120μg/ml、≥130μg/ml、≥140μg/ml、≥150μg/ml、≥160μg/ml、≥170μg/ml、≥180μg/ml、≥190μg/ml、≥200μg/ml、≥210μg/ml、≥220μg/ml、≥230μg/ml、≥240μg/ml、≥250μg/ml、≥260μg/ml、≥270μg/ml、≥280μg/ml、≥290μg/ml、≥300μg/ml、≥310μg/ml、≥320μg/ml、≥330μg/ml、≥340μg/ml、≥350μg/ml、≥360μg/ml、≥370μg/ml、≥380μg/ml、≥390μg/ml、≥400μg/ml、≥410μg/ml、≥420μg/ml、≥430μg/ml、≥440μg/ml、≥450μg/ml、≥460μg/ml、≥470μg/ml、≥480μg/ml、≥490μg/ml、≥500μg/ml、≥510μg/ml、≥520μg/ml、≥530μg/ml、≥540μg/ml、≥550μg/ml、≥560μg/ml、≥570μg/ml、≥580μg/ml、≥590μg/ml、≥600μg/ml、≥610μg/ml、≥620μg/ml、≥630μg/ml、≥640μg/ml、≥650μg/ml、≥660μg/ml、≥670μg/ml、≥680μg/ml、≥690μg/ml、≥700μg/ml、≥710μg/ml、≥720μg/ml、≥730μg/ml、≥740μg/ml、≥750μg/ml、≥760μg/ml、≥770μg/ml、≥780μg/ml、≥790μg/ml、≥800μg/ml、≥810μg/ml、≥820μg/ml、≥830μg/ml、≥840μg/ml、≥850μg/ml、≥860μg/ml、≥870μg/ml、≥880μg/ml、≥890μg/ml、≥900μg/ml、≥910μg/ml、≥920μg/ml、≥930μg/ml、≥940μg/ml、≥950μg/ml、≥960μg/ml、≥970μg/ml、≥980μg/ml、≥990μg/ml、≥1000μg/ml或更高)的最低濃度。維持劑量可以以一定濃度(例如10mg/kg-60mg/kg，例如10mg/kg、30mg/kg或60mg/kg)或固定劑量(例如約600mg至4000mg，例如2400mg、2500mg、3000mg或3200mg)施用于受試者，優(yōu)選地，該劑量低于先前施用于相同受試者或相同體重級別的受試者的負荷劑量。